Identificação e análise da transcrição diferencial de genes em peixes Poecilia vivipara expostos ao herbicida Atrazina

Abstract

A Atrazina e muito utilizada no controle de erva-daninhas em cultivos agricolas, e como consequencia de seu uso, tem sido detectada no solo, aguas superficiais e subterraneas. Peixes tem sido muito utilizados como modelos em estudos de ecotoxicologia, indicando o risco biologico de exposicao a contaminantes. O objetivo desse trabalho foi identificar e validar genes diferencialmente transcritos no figado de Poecilia vivipara expostos a ATZ (100ug/L). Para tanto, foi realizada uma primeira exposicao com 100ug/L de ATZ a peixes P. vivipara oriundos de bioterio e empregado o metodo de hibridizacao subtrativa supressiva (SSH). A identificacao destes genes foi realizada por homologia com o banco de dados NCBI (Blastx), resultando em 34 sequencias que aparentemente tiveram uma repressao na transcricao e 61 dos genes que apresentaram um aumento na transcricao. Visando a analise de alguns genes provenientes da biblioteca subtrativa, uma segunda exposicao foi realizado com peixes proveninentes de ambiente natural e expostos a concentracoes crescentes de ATZ (2, 10 e 100 ug/L) por 24h. Os genes selecionados foram fibrinogenio gama e beta, inibidor de BAX, vitelogenina A, componente complemento C3 e C9 e ligante de acidos graxos. Os genes C9 e Fibrinogenio Beta aparentemente mostraram um aumento na transcricao nos tratamentos de 10 e 100 ug/L de ATZ em relacao ao grupo controle; e Vitelogenina A apresentou um aumento na transcricao nos animais do tratamento de 10ug/L de ATZ em relacao ao controle. Entretanto, os dois primeiros foram identificados na biblioteca dos genes reprimidos por ATZ. De forma similar, o gene Inibidor Bax-1 apresentou uma diminuicao em sua transcricao no figado dos animais tratados com 10ug/L de ATZ, apesar de estar presente na biblioteca dos genes induzidos. Tais discrepancias podem ser atribuidas a possiveis alteracoes populacionais, uma vez que o experimento preparatorio para a subtracao foi realizado com animais provenientes de cultivo no bioterio da FURG-RS e os experimentos de validacao foram realizados com populacoes de animais de ambiente natural em Florianopolis - SC.