Departamento de Patologia

Avaliação do efeito antitumoral in vitro e in vivo do extrato de Tithonia diversifolia rico em tagitinina c obtido com CO2 supercrítico encapsulado em nanossistema lipossomal

2025-09-08T00:00:00Z

Avaliação do efeito antitumoral in vitro e in vivo do extrato de Tithonia diversifolia rico em tagitinina c obtido com CO2 supercrítico encapsulado em nanossistema lipossomal Santos, Lívia Lima O câncer é uma das principais causas de morte no mundo, sendo responsável por cerca de 10 milhões de óbitos em 2020. Apesar da eficácia, os tratamentos convencionais, como a quimioterapia, estão associados a alta toxicidade e múltiplos efeitos adversos, o que compromete a qualidade de vida dos pacientes e reforça a necessidade de alternativas terapêuticas mais seguras. Entre os compostos naturais de interesse, destacam-se os sesquiterpenos, que apresentam atividade antitumoral relevante. A tagitinina C, uma lactona sesquiterpênica isolada da Tithonia diversifolia (girassol-mexicano), tem demonstrado efeito contra diferentes linhagens tumorais. Neste estudo, avaliou-se o efeito antitumoral do extrato de T. diversifolia rico em tagitinina C, obtido por extração com CO₂ supercrítico e posteriormente encapsulado em lipossomas (LPEG-ESTD). A extração supercrítica foi escolhida por ser uma técnica limpa e seletiva, sem resíduos tóxicos, resultando em um extrato com rendimento de 2,22%. O encapsulamento em lipossomas visou aumentar a estabilidade, controlar a liberação e reduzir a toxicidade do extrato. Os ensaios in vitro foram realizados em diferentes linhagens celulares, incluindo HCT116, PC3 e B16F10. O extrato apresentou elevada atividade citotóxica contra células tumorais, com valores de IC₅₀ de 8,06 μg/mL (extrato livre) e 10,61 μg/mL (LPEG-ESTD), confirmando seu potencial antitumoral e seletividade em relação a células não malignas. Nos ensaios in vivo, utilizando camundongos Swiss portadores de sarcoma 180, foram comparados os efeitos de diferentes grupos experimentais: controle (solução salina), lipossoma vazio, extrato livre (10 mg/kg), LPEG-ESTD (1, 3 e 10 mg/kg) e o quimioterápico 5-fluorouracil (5-FU). Após 7 dias de tratamento, observou-se significativa redução da massa tumoral nos grupos tratados com LPEG-ESTD (3 e 10 mg/kg), em magnitude semelhante ao grupo tratado com 5-FU. As análises histopatológicas mostraram que os tumores tratados com LPEG-ESTD10 e 5-FU apresentaram menor atividade mitótica e áreas de necrose, indicando redução da agressividade tumoral. Além disso, os parâmetros hematológicos e bioquímicos evidenciaram que, enquanto o 5-FU e o extrato livre causaram leucopenia e toxicidade hepática/renal, o LPEG-ESTD preservou as funções hematológica, hepática e renal, sugerindo efeito protetor do encapsulamento contra os efeitos adversos. Conclui-se que o extrato de Tithonia diversifolia encapsulado em lipossomas apresenta forte efeito antitumoral in vitro e in vivo, com menor toxicidade em comparação ao extrato livre e à quimioterapia convencional. Esses achados reforçam o potencial do LPEG-ESTD como uma alternativa promissora para o desenvolvimento de novas terapias contra o câncer. Seminário de Iniciação Científica e Tecnológica. Universidade Federal de Santa Catarina. CCS. Departamento de Patologia.

Imunoexpressão de HDAC1, HDAC2 e HAT1 em sítios primários e linfonodais afetados por carcinoma epidermoide

2025-09-07T00:00:00Z

Imunoexpressão de HDAC1, HDAC2 e HAT1 em sítios primários e linfonodais afetados por carcinoma epidermoide Bruschi, Pietro Lucca Bonissoni Os níveis de acetilação das histonas são cruciais na remodelação da cromatina e na regulação da transcrição gênica. A desregulação desse sistema, mediado por proteínas epigenéticas, como as HDACs e HATs, pode levar a ativação transcricional de um conjunto de oncogenes ligados à proliferação, migração, angiogênese, diferenciação, invasão e metástase, e repressão de genes supressores tumorais. Estudos indicam que alterações epigenéticas, como modificações de histonas, contribuem para a carcinogênese bucal, especialmente na progressão do tumor e resistência terapêutica. O estudo da imunoexpressão de HDAC1, HDAC2 e HAT1 em sítios primários e linfonodais afetados por carcinoma epidermóide (CEC) será pioneiro e visa aprofundar o entendimento da epigenética na carcinogênese bucal e suas possíveis metástases. O objetivo é investigar a expressão imuno-histoquímica de HDAC1, HDAC2 e HAT1 em tecidos primários e linfonodais com carcinoma epidermóide bucal (CEB). Amostras tumorais de 20 pacientes diagnosticados com CEB e metástase linfonodal, provenientes do HU/EBSERH/UFSC (2007-2018), foram analisadas. Cortes de 5 μm de espessura em tecidos incluídos em parafina foram corados por H&E para confirmação do diagnóstico. Reações imuno-histoquímicas foram realizadas para avaliar a expressão de HDAC1, HDAC2 e HAT1, que posteriormente foram avaliadas por um examinador calibrado. Testes estatísticos paramétricos e não paramétricos foram utilizados para a comparação dos parâmetros clínicos e avaliação qualitativas dos imunomarcadores, considerando-se p<0,05 (5%) como estatisticamente significativo. A HDAC2 apresentou níveis elevados de expressão nos tumores primários bem diferenciados, sugerindo possível envolvimento na manutenção da diferenciação celular. A HAT1, por sua vez, demonstrou expressão significativamente maior em linfonodos metastáticos sem invasão linfovascular e perineural, o que sugere sua atuação como regulador negativo da capacidade invasiva tumoral e seu potencial como marcador de comportamento menos agressivo. Em contraste, a HDAC1 não apresentou associação estatisticamente significativa com as variáveis clínicas e histopatológicas analisadas, tanto em tumores primários quanto em linfonodos metastáticos. Seminário de Iniciação Científica e Tecnológica. Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciências da Saúde. Departamento de Patologia.

Emprego da raiz de Cannabis sp. como fase sortiva no controle de qualidade de óleos medicinais

2025-09-07T00:00:00Z

Emprego da raiz de Cannabis sp. como fase sortiva no controle de qualidade de óleos medicinais Galetti, Isabela Nucci A utilização da cannabis medicinal, mais especificamente o potencial terapêutico dos canabinoides, têm atraído atenção significativa nos últimos anos, principalmente no tratamento de dor crônica, esclerose múltipla, epilepsia e até mesmo para alguns casos psiquiátricos, como depressão e esquizofrenia. Os fitocanabinoides abarcados pela legislação vigente (RDC nº 327 de 2019) são o Canabidiol (CBD) e o Tetrahidrocanabinol (Δ9-THC), sendo que o primeiro tem recebido cada vez mais destaque pelas suas propriedades psicotrópicas, no âmbito medicinal e recreativo. Ademais, houve um crescimento em relação a produção nacional de produtos à base de Cannabis sativa L, por meio das Associações Canábicas, mas a maioria não apresentam estrutura para a quantificação de fitocanabinoides, sendo necessário garantir a padronização do teor nos produtos disponibilizados para o público. Nesse sentido, o presente trabalho teve como objetivo desenvolver e validar uma metodologia rápida e econômica na qual emprega a raiz de Cannabis sp. como fase sortiva no controle de qualidade de óleos medicinais. Sendo a raiz, a parte menos explorada e mais desprezada da planta, pela baixa concentração dos canabinóides clássicos devido à reduzida densidade de tricomas glandulares que, consequentemente, tem um menor nível de biossíntese de canabinóides. O método de preparo da amostra avaliado foi o de extração em fase sólida dispersiva, na qual utiliza a raiz de Cannabis sp. como biossorvente. Foram avaliadas 4 variáveis: massa da fase sortiva, o volume do óleo, o solvente de diluição e o tempo de agitação por meio de um planejamento fatorial, com um total de 11 experimentos. Já o tipo e volume do solvente de dessorção foram avaliados de forma univariada. Após os testes o método definido foi: 30 mg de raiz triturada e tamisada sobre 60 mg de óleo diluído em 1 mL de etanol, em tubo falcon, para seguidamente agitar por 5 minutos e colocar em centrífuga por 10 min 7000 rpm, descarta o sobrenadante e adiciona solvente de dessorção 0,5 mL de etanol no tubo, para seguidamente agitar novamente por 5 minutos e colocar na centrífuga por 10 min 7000 rpm, para por fim injetar 200 uL no CLAE-DAD. Os analitos CBD e Δ9-THC obtiveram um tempo de retenção de 7,5 e 13,5 min respectivamente. Com limite de detecção de 18,5 μg/mL e limite inferior de quantificação de 20 μg/mL para ambos. Avaliou-se também a linearidade do método na qual tanto para CBD quanto para Δ9-THC apresentaram uma curva analitica satisfatória, com valor de r de 0,995 e 0,994 respectivamente. Já em relação à exatidão, precisão, efeito residual e seletividade apresentaram resultados satisfatórios para os analitos de interesse. Ao final, foi possível dosar o teor dos canabinóides Δ9-THC e CBD presentes no produto para controle de qualidade, com o intuito de garantir confiabilidade e segurança para os usuários, com um método simples, rápido, econômico e verde. Seminário de Iniciação Científica e Tecnológica. Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciências da Saúde. Departamento de Patologia.

investigação dos efeitos do agonista canabinoide cb2, β-cariofileno, sobre as memórias associativas em modelo animal de dependência aos opioides

2025-10-27T00:00:00Z

investigação dos efeitos do agonista canabinoide cb2, β-cariofileno, sobre as memórias associativas em modelo animal de dependência aos opioides Kievel, Eduardo Backes A dependência de drogas é sustentada por memórias associativas desadaptativas, formadas por processos de aprendizado que ligam pistas ambientais aos efeitos recompensadores da substância. Essas memórias, antes consideradas estáveis, podem ser parcialmente enfraquecidas ou até mesmo modificadas por meio da reconsolidação, um processo que ocorre quando uma memória previamente consolidada é reativada, tornando-se temporariamente lábil e suscetível a intervenções farmacológicas ou comportamentais. Essa “janela de reconsolidação” representa uma oportunidade terapêutica para atenuar memórias ligadas à experiência com drogas, reduzindo a probabilidade de recaídas induzidas por estímulos condicionados. Neste estudo, avaliou-se o efeito do β-cariofileno (BCP), um agonista seletivo dos receptores canabinoides do tipo CB2, sobre a evocação e reconsolidação de memórias condicionadas à morfina em ratos Wistar, utilizando o modelo de preferência condicionada ao lugar (PCL). Após o treinamento e reativação da memória, os animais receberam tratamento agudo com BCP (5 mg/kg, i.p.). Os resultados mostraram que o BCP atenuou a expressão da memória hedônica associada à morfina, sem interferir no comportamento locomotor, e bloqueou a reconsolidação da memória aversiva induzida por naltrexona. Esse efeito foi revertido pela administração do antagonista CB2 AM630, sugerindo participação direta desses receptores no fenômeno observado. Em sequência, foram avaliados os efeitos do agonista sintético CB2 AM1241 e investigado se sua ação sobre a reconsolidação poderia ser bloqueada pelo pré-tratamento com AM630. Observou-se que tanto o BCP quanto o AM1241 atenuaram a expressão e a manutenção da memória condicionada à morfina, porém o AM1241 apresentou efeito mais duradouro. O impacto do AM1241 também foi revertido pelo antagonista CB2, reforçando que os efeitos benéficos estão associados à ativação seletiva desses receptores. Esses achados demonstram, que a ativação aguda dos receptores CB2 durante a janela de reconsolidação pode interferir na manutenção de memórias hedônicas induzidas por opioides. Tais resultados fortalecem a hipótese de que estratégias terapêuticas baseadas na ativação seletiva de CB2, associadas a protocolos de exposição controlada a pistas condicionadas, podem representar uma abordagem promissora para prevenir recaídas motivadas por memórias associativas desadaptativas.