https://repositorio.ufsc.br/handle/123456789/277310 2026-11-10T02:41:10Z 2026-11-10T02:41:10Z Silva, Ana Merian da https://repositorio.ufsc.br/handle/123456789/277391 2026-11-06T17:12:14Z 2026-01-01T00:00:00Z

Ativação do receptor TRPA1 participa da irritação de pele induzida pelo ditranol em camundongos Silva, Ana Merian da A psoríase é uma doença inflamatória crônica da pele, caracterizada principalmente pela hiperproliferação de queratinócitos, infiltração e ativação de células imunes, e aumento da inervação por neurônios sensoriais. Evidências crescentes sugerem o envolvimento de múltiplos subtipos dos canais de potencial receptor transitório (TRP) na patogênese da psoríase, incluindo alterações em sua expressão em pacientes. Além disso, estudos recentes indicam a participação desses canais nos efeitos adversos associados à farmacoterapia tópica e a fototerapia utilizadas no tratamento da doença. Nesse estudo, investigamos se o ditranol, um dos medicamentos tópicos mais eficazes no tratamento da psoríase em placa, mas que apresenta efeitos adversos irritativos no local da aplicação, poderia ter canais TRP como alvos farmacológicos. Para isso, realizamos ensaios não-clínicos cegos e randomizados em camundongos C57BL/6 machos e fêmeas, com o objetivo de elucidar o papel dos canais TRPA1, TRPV1 e TRPV4 na irritação cutânea induzida pelo ditranol. Ditranol 0,5% ou o veículo foi aplicado topicamente na orelha direita dos animais, e edema, eritema e prurido foram monitorados entre 2 horas a 7 dias após a aplicação. Expressão de genes e infiltração de leucócitos também foram realizadas. Uma única aplicação de ditranol causou edema e eritema, mas não prurido, com início 24 horas após o tratamento e persistindo por até 7 dias. O tratamento também promoveu infiltração leucocitária no tecido irritado, com aumento de neutrófilos e células dendríticas, além da elevação da expressão de genes associados à resposta imune, como Tnf e S100a8 e S100a9. Em relação a expressão dos canais TRP, o ditranol induziu aumento significativo de Trpv1 no linfonodo auricular drenante e nos DRGs, em 24 horas e 7 dias após tratamento, bem como um aumento da expressão de Trpa1 nos linfonodos em 7 dias, mas redução da expressão no DRG em 24 horas. No entanto, não foram observadas alterações na expressão de Trpa1, Trpv1 ou Trpv4 no tecido da orelha em nenhum dos tempos avaliados. Apesar disso, o antagonismo farmacológico de TRPV1 ou TRPV4 não alterou os parâmetros de irritação cutânea induzida por ditranol, e esse também não foi capaz de ativar esses canais expressos em células HEK293. Em contraste, o ditranol ativou diretamente o canal TRPA1, promovendo influxo de cálcio. Contrariamente ao esperado, o antagonismo de TRPA1 resultou em piora da irritação cutânea, principalmente ao final do período de avaliação, sugerindo que TRPA1 parece desempenhar um papel protetor na resposta inflamatória cutânea induzida pelo ditranol. Por fim, utilizando farmacologia de rede, fizemos a predição de novos alvos farmacológicos para o ditranol, incluindo o EGFR, o DNMT1 e o TLR2. Os dados indicam que a irritação cutânea provocada por esse fármaco resulta de uma interação complexa entre vários alvos farmacológicos, e que o TRPA1 parece exercer efeito protetor contra a irritação. No entanto, o mecanismo exato responsável por essa irritação ainda não foi completamente elucidado.; Abstract: Psoriasis is a chronic inflammatory disease characterized primarily by keratinocyte hyperproliferation, immune cell infiltration and activation, and increased sensory nerve innervation. Growing evidence suggests the involvement of multiple transient receptor potential (TRP) channel subtypes in the pathogenesis of psoriasis, including altered expression patterns in patients. Furthermore, recent studies indicate that these channels play a role in the adverse effects associated with the topical pharmacotherapy and phototherapy used to treat the disease. In this study, we investigated whether TRP channels might serve as pharmacological targets for dithranol, one of the most effective topical treatments for plaque psoriasis, yet one that causes irritative adverse effects at the application site. To this end, we conducted randomized, blinded non-clinical assays using male and female C57BL/6 mice, aiming to elucidate the roles of TRPA1, TRPV1, and TRPV4 channels in dithranol-induced skin irritation. Dithranol (0.5%) or the vehicle was applied topically to the animals' right ears, and edema, erythema, and pruritus were monitored from 2 hours to 7 days post-application. Gene expression analysis and assessment of leukocyte infiltration were also performed. A single application of dithranol caused edema and erythema but not pruritus, starting 24 hours after treatment and persisting for up to 7 days. Treatment also promoted leukocyte infiltration into the irritated tissue, characterized by an increase in neutrophils and dendritic cells, as well as elevated expression of immune response-associated genes such as Tnf, S100a8, and S100a9. Regarding TRP channel expression, dithranol induced a significant increase in Trpv1 levels in the draining auricular lymph node and dorsal root ganglia (DRGs) at both 24 hours and 7 days post-treatment; it also increased Trpa1 expression in the lymph nodes at 7 days but reduced it in the DRG at 24 hours. However, no changes in Trpa1, Trpv1, or Trpv4 expression were observed in the ear tissue at any of the time points evaluated. Furthermore, pharmacological antagonism of TRPV1 or TRPV4 did not alter dithranol-induced skin irritation parameters, nor did dithranol activate these channels when expressed in HEK293 cells. In contrast, dithranol directly activated the TRPA1 channel, promoting calcium influx. Unexpectedly, TRPA1 antagonism worsened skin irritation particularly toward the end of the evaluation period suggesting that TRPA1 plays a protective role in the dithranol-induced cutaneous inflammatory response. Finally, using network pharmacology, we predicted novel pharmacological targets for dithranol, including EGFR, DNMT1, and TLR2. The data indicate that the skin irritation caused by this drug results from a complex interaction among multiple pharmacological targets and that TRPA1 appears to exert a protective effect against irritation. However, the exact mechanism responsible for this irritation has not yet been fully elucidated. Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2026.

2026-01-01T00:00:00Z